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Unidad de Biología Celular (UBC)

Mariela Bollati

Responsable: Mariela Bollati
Contacto Personal


La UBC provee las tecnologías modernas para la investigación en el campo de la biología celular. Está organizada en tres áreas principales:

  • Laboratorio de cultivos celulares: para el manejo de líneas celulares establecidas/inmortalizadas, células madre y para la obtención/manipulación de cultivos primarios.
  • Laboratorio de Citometría de flujo: para análisis de diferentes poblaciones celulares o partículas y para la separación celular.
  • Laboratorio de microscopía de luz: para el análisis de estructuras celulares y/o de moléculas (estará disponible a partir del 2007).


 

El objetivo de la UBC en el IP Montevideo es proveer de equipamiento, conocimiento, entrenamiento, asistencia y servicios en el campo de investigación de la biología celular. Las facilidades fueron instaladas en octubre de 2006 y está planeado que estén totalmente funcionando en 2007.

Servicios Disponibles

  • Cultivo de diferentes líneas celulares, almacenamiento celular.
  • Detección de micoplasma y contaminación viral en cultivos celulares.
  • Desarrollo de ensayos biológicos, ensayos de proliferación y/o ensayos antivirales.
  • Adaptación de diferentes líneas celulares al crecimiento en suspensión y a medios libres de suero.
  • Generación de nuevas líneas celulares por ingeniería genética, para ser empleadas tanto en investigación básica como aplicada.
  • Análisis e identificación de poblaciones celulares mediante sondas fluorescentes: inmunofenotipado, contenido de ADN y análisis de ciclo celular, citoquinas intracelulares, apoptosis.
  • Separación de poblaciones celulares heterogéneas en poblaciones homogéneas: separación de eventos raros, separación en condiciones de esterilidad, depósito de 1 célula, clasificación hasta 4 tipos de poblaciones diferentes
  • Asesoramiento y consejo en técnicas de citometría de flujo.

Servicios y/o técnicas adicionales serán implementadas/ofrecidas según petición de diferentes grupos de investigación.


Olympus CKX31

Facilidades y equipamiento

Laboratorio de Cultivo Celular: 3 habitaciones acondicionadas para la manipulación de cultivos celulares, equipadas con:

  • Microscopio invertido
  • Incubadores CO2
  • Campanas de flujo laminar para cultivo celular
  • Unidad de congelamiento lento y almancenamiento de N2
  • Centrífugas citológicas refrigeradas

Microscopio invertido Olympus CKX31: equipado con un tubo fijo binocular de observación que brinda una alta performance/resolución óptica.


Olympus SZ61

Microscopio estéreo Olympus SZ61: estéreo-microscopio con zoom para aplicaciones de rutina.

Freezer Thermo CryoMed para congelamiento controlado: proporciona  flexibilidad para el control de la velocidad de congelamiento. 

Contenedor de almacenamiento Thermo: el nitrógeno líquido se carga manualmente y se permite el almacenamiento de células, con una capacidad de conservar hasta 3600 ampollas.
Rigaku
N2 storage container

 

 

 


Citometría de Flujo

La Citometría de Flujo es un método que permite el análisis rápido de ciertas características de células o partículas en suspensión, las cuales producen una señal al interferir con una fuente de luz. La separación celular de alta velocidad  combina la citometría de flujo con métodos eléctricos o mecánicos para clasificar  y colectar células con una o más características medibles dentro de rangos establecidos por el usuario.

La citometría de flujo puede medir características físicas tales como tamaño celular, forma, complejidad interna y cualquier componente o función  celular que pueda ser detectado mediante el empleo de un compuesto fluorescente. Las aplicaciones de la citometría de flujo son numerosas, lo cual ha llevado a la expansión del uso de estos instrumentos en biología celular y campos médicos. Nuestro laboratorio de citometría de flujo está equipado con:

Separador Celular de Alta Velocidad MoFlow (DakoCytomation):

Este separador celular purifica poblaciones mediante la separación de células o partículas basado en 9 parámetros diferentes (forward y side light scatter y 7 fluorocromos diferentes) usando una o dos de las siguientes longitudes de onda de excitación 488 (Lyt 200-S) o UV (Innova 90C-6). Análisis multiparamétrico de muestras heterogéneas de células, cromosomas, bacterias, o partículas macromoleculares pueden ser clasificadas en cuatro tubos colectores diferentes a velocidades aproximadas de 60.000 eventos por segundo.


 

CyAn High-Performance Flow Cytometer (DakoCytomation):

Este citómetro de flujo posee dos láseres 488 y 635 nm que son capaces de analizar 9 parámetros simultáneamente (forward y side light scatter y 7 fluorocromos diferentes) a velocidades hasta de 20.000 eventos/segundo. Este analizador es útil para la detección de células que se encuentran en baja proporción y para aquellas aplicaciones que requieren más de 4 fluorocromos para definir una población celular.

 

Análisis de Datos
El software Summit (Versión 4.3) es utilizado para la adquisición y análisis de datos en ambos citómetros de flujo.

 
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